检验方法说明

检测项目 标本要求

化学发光法

依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量的一种定量分析方法。

电化学发光法

在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,用电化学发光剂三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+标记AbAg,通过Ag-Ab反应和磁珠分离技术,根据三联吡啶钌在电极上发出的光强度对待测的AgAb进行定量/定性。

免疫比浊法

当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊度。当抗体浓度固定时,形成的免疫复合物的量随着检样中抗原/抗体量的增加而增加,反应液的浊度也随之增加。通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照,即可计算出检样中抗原/抗体的含量。

间接免疫荧光法

以荧光素标记抗球蛋白抗体,抗体与相应抗原结合后,荧光标记的抗球蛋白抗体与已结合的抗体发生作用,从而推知抗原或抗体的存在。间接荧光技术可以用已知的抗原检测未知的抗体,也可用已知的抗体测出未知抗原。

放射免疫法

利用同位素标记的与未标记的抗原同抗体发生竞争性抑制反应的放射性同位素体外微量分析方法。

高效液相色谱法

在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱;同时柱连后有高灵敏度的检测器,可对流出物连续检测分析。

酶联免疫吸咐法

简称ELISA法,采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,对受检物质进行定性或定量分析的一种检测方法。

微柱凝胶法

利用微柱凝胶的微孔过滤作用和抗原抗体特异性反应的作用,通过离心技术,利用凝胶微柱层析分子排阻原则将发生凝集反应的红细胞阻滞于凝胶之内,而未凝集的单个红细胞则穿过微孔运动至柱底,从而区分有无凝集的方法。

流式细胞术

利用流式细胞仪对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒(如微球,细菌,小型模式生物等)逐个进行快速定量分析和分选的技术。

免疫散射比浊法

一定波长的光沿水平轴照射,通过溶液遇到抗原抗体复合物粒子,光线被粒子颗粒折射,发生偏转,光线偏转的角度与发射光的波长和抗原抗体复合物颗粒大小和多少密切相关。散射光的强度与复合物的含量成正比,即待测抗原越多,形成的复合物也越多,散射光也越强。

免疫印迹法

将凝胶电泳与固相免疫结合,首先通过蛋白质电泳技术将需要区分的蛋白质转移至固相载体如NC膜上,再借助酶免疫等技术进行测定,能分离分子大小不同的蛋白质并确定其分子质量,常用于检测多种病毒抗体或抗原。

免疫斑点法

硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜具有很强的静电吸附力,在中性条件下即可有效地吸附蛋白质等生物大分子,因而将抗原吸附于纤维素膜后,就可利用纤维素膜作为固相载体进行抗原—抗体反应。当加入抗体后,即可与膜上的抗原结合,然后再加入带有标记物的抗体,使标记通过抗抗体和相应抗体的结合间接地交联于纤维素膜上。加入标记物相应的底物后,标记物即可与底物作用形成不溶性产物,呈现斑点状着色,从而判定结果。

 

免疫层析法

将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带,当该干燥的硝酸纤维素一端浸入样品(尿液或血清)后,由于毛细管作用,样品将沿着该膜向前移动,当移动至固定有抗体的区域时,样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合,若用免疫胶体金或免疫酶染色可使该区域显示一定的颜色,从而实现特异性的免疫诊断。

生物芯片法

通过缩微技术,根据分子间特异性地相互作用的原理,将生命科学领域中不连续的分析过程集成于硅芯片或玻璃芯片表面的微型生物化学分析系统,以实现对细胞、蛋白质、基因及其它生物组分的准确、快速、大信息量的检测。

染色体G带分析

将染色体标本用碱、胰蛋白酶或其他盐溶液处理后,再用Giemsa染液,在普通显微镜下,可见深浅相间的带纹,通过条纹来识别染色体的异常。

染色体R带分析

R带所显示之深浅带纹区域正好与G带之带相反,观察末端缺失,R显带可补充G显带末端浅染缺点,加强染色体末端微小异常的识别。

胶体金法

由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。

原子吸收光谱法

基于气态基态原子外层电子对紫外光和可见光范围的相对应原子共振辐射线的吸收强度来定量被测元素含量为基础的分析方法,是一种测量特定气态原子对光辐射的吸收的方法。

时间分辨荧光免疫

用镧系元素螯合物作为示踪物标记抗原或抗体,当免疫过程结束后,根据镧系元素螯合物的发光特点,并采用解离-增强技术放大有效荧光,最后用时间分辨荧光分析仪,测定免疫反应最后产物的荧光强度。

实时荧光定量PCR

指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

速率法

又称连续检测法,是指在多个时间点连续监测产物或底物在线性范围内的生成量即零级反应速率测定酶活性的方法

椎板法

通过一个低惯性的转矩马达对被测试液体施加一个受控应力,驱动轴由一个低阻力磁浮轴承保持在中心位置,它将施加的应力传递到被测液体上,其测试头为锥板式。其测试原理是依据牛顿粘性定理,即理想液体在层流条件下服从下列关系:τ=ηγ。

酶循环法

胆汁酸被3a-羟基类固醇脱氢酶及Thio-NAD+特异性地氧化,生成3-酮类固醇及Thio-NADH,生成的3-酮类固醇在3a-羟基类固醇脱氢酶及NADH存在下,生成胆汁酸和NAD+,测定生成的Thio-NADH的吸光度变化,以求得胆汁酸值。

凝集法

特异性的抗原与相应的抗体反应,出现肉眼可见的凝集颗粒。

亚铁嗪法

血清铁与转铁蛋白结合成复合物,在酸性介质中,铁从复合物中解离出来,被还原剂还原成二价铁,并与亚铁嗪生成紫红色化合物,在波长562nm处有一吸收峰,与同样处理的标准液比较,即可求得血清铁含量。

酶法

利用酶催化一系列生物化学反应,最终产生可用现有检测方法测定的物质的技术。

离子选择电极法

利用膜电位测定溶液中离子活度或浓度的方法。

偶氮胂III

钙离子和偶氮胂Ⅲ形成的紫蓝色络合物在640-650nm波长处有吸收峰,在一段范围内吸光度(A)与钙含量成正比。

化学氧化法

化学氧化法就是通过氧化剂通过失去电子对目标物进行氧化的方法。

LD-L

乳酸脱氢酶能催化乳酸还原生成丙酮酸,同时NAD+被还原成NADH,引起340nm吸光度的上升,其上升速率与样本中LDH活力成正比

计算法

根据先前检测获得的数据,经过数学计算获得目标数值.

麦芽七糖苷法

以亚乙基封闭的对硝基苯-麦芽庚糖 (EPS G7) 为底物的酶连续监测法。α-淀粉酶催化EPS G7分解,并经过偶联的α-葡萄糖苷酶作用,最后使pNP释放,pNP410405 nm

波长处有吸收峰,其生成的速度与血清中α-AMY的含量成正比。在410 nm波长处连续监测pNP的生成速率,推算出α-AMY含量。

已糖激酶法

在己糖激酶(HK)催化下,葡萄糖和三磷酸腺苷(ATP)发生磷酸化反应,生成葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)和二磷酸腺苷(ADP)。G-6-P在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)催化下脱氢,生成6-磷酸葡萄糖酸内脂(6-PGA),同时使NADP+还原成NADPH +H+。反应中NADPH的生成速率和生成量与葡萄糖浓度成正比,在波长340nm监测吸光度的升高值(ΔA),可计算血清中葡萄糖浓度。

镜检法

利用显微镜对人体的排泄物、分泌物、脱落细胞和人体组织等进行分析判断,来诊断人体疾病的方法。

荧光原位杂交FISH

将已用荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的经固定的组织、细胞或染色体中DNARNA(玻片上的标本)在复性时进行碱基互补杂交,继而通过检测荧光杂交信号,对特异DNARNA序列在染色体或DNA纤维上进行定位、定性、相对定量的检测和分析。

毛细管电泳

毛细管电泳,又称高效毛细管电泳,是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。

双缩脲法

碱性溶液中的铜离子和蛋白质或多肽分子中的肽键反应,生成紫红色络合物,络合物在波长540nm处的吸光度和蛋白质的浓度成正比。

溴甲酚绿法

pH4.0的溶液中,溴甲酚绿与白蛋白立即反应形成绿色复合物,此复合物在波长600nm处的吸光度与清蛋白的浓度成正比。

�-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺法

�-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺(GluCANA)为底物,将底物上的谷氨酰基转移至受体双甘肽,生成5-氨基-2-硝基苯甲胺和�-谷氨酰双甘肽。5-氨基-2-硝基苯甲胺在405nm波长处有光吸收峰,吸光度升高的速率与样本中GGT活力成正比。

酶比色法

 

胆固醇酯水解酶(CEH)将血清中的胆固醇酯(CE)水解成游离胆固醇(Chol),胆固醇氧化酶(CHOD)将水解生成的胆固醇和血清中原来存在游离胆固醇氧化成△4-胆甾烯酮,并产生过氧化氢(H2O3),最后在过氧化物酶(POD)的作用下H2O3与4-氨基安替比林(4-AAP)和酚(三者合称PAP)缩合,生成红色醌亚胺色素(Trinder反应)。醌亚胺在500-550nm波长处有吸收峰,吸光率(ΔA)与样本中总胆固醇呈正比。

选择性抑制法

 

试剂1中具有特异选择性的强离子的缓冲液与表面活性剂TritonX-100作用与血清中的CMVLDLLDL,使其所含有的胆固醇暴露,在CECO的催化反应下生成H2O2H2O2被过氧化氢酶(catalase)分解为H2OO2而被清除。试剂2中的叠氮钠抑制了过氧化氢酶活性。另一表面活性剂使HDL颗粒中的胆固醇暴露,并与胆固醇酶试剂发生反应,用标准的Trinder反应即可测定HDL-C

选择性清除法

根据各类脂蛋白物理化学性质不同,与表面活性剂反应也不同的原理,使用2种表面活性剂所组成。在第一反应中,表面活性剂1能改变LDL以外的(CM、VLDL、HDL等)脂蛋白的结构,与胆固醇氧化酶、胆固醇酯酶起反应。因此,LDL没有反应,而CM、VLDL、HDL等反应被促进。在表面活性剂1的作用下,LDL以外的脂蛋白被消除。第二反应中,表面活性剂2能促进各类脂蛋白的酶反应。此时,在第一反应中没被消除的LDL在表面活性剂2的作用下,产生呈色反应。

四氮唑蓝显色法

血清(浆)果糖胺是一种大分子酮胺类化合物。在碱性条件下可将四氮唑蓝(NBT)还原生成紫色的甲月替,其生成量与果糖胺浓度成正比。用比色法在546nm波长下,以糖化血清蛋白为校正物,可测出反应中月替 生成量,从而求得血清果糖胺的浓度。

紫外法

无机磷酸盐与钼酸盐反应,形成非还原性磷钼酸化合物。使用表面活性剂消除样本中蛋白质的影响。在340nm波长处的吸光度与样本中无机磷的浓度成正比。

循环酶法

胆汁酸被3a-羟基类固醇脱氢酶及Thio-NAD+特异性地氧化,生成3-酮类固醇及Thio-NADH,此外,生成的3-酮类固醇在3a-羟基类固醇脱氢酶及NADH存在下,生成胆汁酸和NAD+。如上述,循环往复从而放大微量的胆汁酸量,测定生成的Thio-NADH的吸光度变化,以求得胆汁酸值。

邻苯三酚红钼法

邻苯三酚红与钼酸结合形成红色复合物,此复合物在酸性条件下与蛋白结合形成蓝紫色复合物,在598nm下有最大的吸收峰,通过测定吸光度变化可计算出尿中总蛋白的含量。

HE染色

苏木精伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

常规石蜡制片

石蜡切片(paraffin section)组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片法包括取材、固定、洗涤、和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤,石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。

免疫组织化学

免疫组织化学(immunohistochemistry)又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。

基因测序法

片段化的基因组DNA,进过克隆,再进行引物杂交和延伸反应,通过荧光标记信号获取测序数据。

高通量测序

一次检测几千万条、甚至几亿条DNA片段,所得片段序列与已知人类基因组序列比对,确定每条DNA片段来自于那条染色体。

RT-PCR

通过对RNA反转录之后再进行PCR扩增并分析的方法。

PCR杂交法

PCR扩增反应后,将扩增产物与包被有特异性探针进行杂交反应。

PCR+反向点杂交

PCR扩增反应后,将扩增产物与包被有特异性探针进行反向点杂交反应。

mPCR

在一个PCR反应体系中同时加多组引物,同时扩增同一DNA模板或不同DNA模板的多个区域。

MLPA

在一个PCR反应体系中同时加多组引物,同时扩增同一DNA模板或不同DNA模板的多个区域。

LD-PCR

长距离DNAPCR反应,应用于长距离的DNA分析。

片段分析

对某特定片段的DNA进行分析和检测。

脱氧核糖核酸

测序法

以待测序列的DNA为模板,加入有放射性标记的四种dNTP,跑电泳后根据放射性显影图谱得到DNA碱基序列。

HE染色

苏木精伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

常规石蜡制片

石蜡切片(paraffin section)组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。

免疫组织化学

免疫组织化学(immunohistochemistry)又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。 免疫组化技术近年来得到迅速发展。50年代还仅限于免疫荧光技术,50年代以后逐渐发展建立起高度敏感,且更为实用的免疫酶技术

Diff-Quik染色

Diff-Quik是商品化的试剂,最早用于鉴别寄生虫,近年来发现此类染色对FNAC检查实用价值巨大,由于其快速、简单且可永久保存,可作为FNAC样初查,是鉴定细胞数量多少、穿刺质量好坏的快速手段。

巴氏染色

巴氏染色主要用于妇科涂片、痰涂片和富含鳞状上皮细胞的涂片,在针吸细胞学涂片中也被广泛应用,特点是细胞透明好,细胞核的结构清晰,胞质色彩丰富而鲜艳。因能显示鳞状上皮不同角化程度,可用于阴道涂片测定激素水平,宫颈涂片内分化差的小角化鳞癌细胞显示橘黄色胞浆,在红色坏死背景中特别突出,不易漏诊,是妇科涂片理想的染色方法。其显著的优点已使之成为宫颈/阴道细胞学检查涂片的国际通用标准染色法。